福建地区肺癌患者EGFR基因突变的研究
Amoydiagnostics Co.,LTD. / 2009-10-14
福建地区肺癌患者EGFR基因突变的研究—一种新的实时PCR方法与传统测序法的比较
福建省肿瘤医院、厦门市第一医院、中国人民解放军174医院、厦门艾德生物医药科技有限公司
收集临床肺癌(含大、小细胞癌)肿瘤石蜡切片样本346例（福建省肿瘤医院、厦门市第一医院、中国人民解放军174医院），以ADx-EGFR实时PCR（艾德公司）和Sanger DNA测序法同时检测EGFR基因外显子18、19、20、21的突变率和突变类型的数目。
结果：ADx-EGFR实时PCR对346例样品检测都得到了清晰明确的结果，检测成功率为100%，Sanger测序成功检测了326例，成功率为94.2%。346例肺癌样品中实时PCR检测82例突变，突变率为23.7%，Sanger测序成功的样品326例，检测突变41例，突变率为12.6%。与测序法比较，实时PCR的突变检测一致率为：100%，野生型检测一致率为：87.8%，总体检测一致率为：88.8%。配对χ2检验，χ2=3208.45，P<0.01，按α=0.05水平，差异有统计学意义，可认为两种检测方法的突变检测结果有差异，艾德试剂检测突变率较高。
结论：采用ADx-EGFR实时PCR方法检测的福建地区肺癌(含大、小细胞癌)中EGFR基因突变率与其他研究报道接近，明显高于Sanger测序法检测出的EGFR突变率（P<0.01）。在肺癌组织中主要以外显子19缺失和外显子21上的L858R的点突变为主，其余的突变较为少见。对于福尔马林固定石蜡包埋样品而言，ADx-EGFR实时PCR对样品的DNA质量的耐受性较好，检测成功率高于Sanger测序。而且ADx-EGFR实时PCR仅一步操作，闭管检测，无污染，90分钟即可判断结果，而Sanger测序法步骤繁琐，易污染，耗时久。因此，ADx-EGFR实时PCR具有很好的临床实用性，将可能代替Sanger测序法作为临床上对肿瘤EGFR基因体细胞突变检测的普遍方法。
